Editorial:
Como en cada edición, el equipo de la revista Bioanálisis les acerca un conjunto de notas con el fin de presentarles los últimos avances en materia de bioquímica y biología molecular. Este nuevo número contiene un trabajo realizado por el Departamento de Bioquímica Clínica del Laboratorio de Proteínas (INFIBIOC) del Hospital de Clínicas José de San Martín sobre un nuevo método para el análisis en la rutina de proteínas urinarias, que se aproxima a la tecnología emergente de la proteómica y permite el análisis simultáneo de varias proteínas urinarias como una herramienta para el diagnóstico y monitoreo de enfermedades humanas. Además, un estudio del semen humano realizado por profesionales de diferentes instituciones de alto prestigio en Argentina donde estandarizan y validan un sistema computarizado de análisis de semen CASA (Sperm Class Analyzer) para los módulos de concentración y movilidad espermática de acuerdo a normas internacionales. La Dra. Imma Caballé Martin, Master en Bioquímica Clínica y Patología Molecular y actual Directora del Instituto CATLAB de Barcelona, España nos cuenta los principales desafíos que afrontó en su camino hacia la mejora de la gestión preanalítica y como fueron resueltos, un aporte muy importante que puede beneficiar al desarrollo de la actividad bioquímica local. Desde el laboratorio MANLAB nos explican la importancia de minimizar los errores en la etapa preanalítica de la toma de muestra y la citología urinaria para poder aumentar la eficacia en el diagnóstico y arribar a un correcto citodiagnóstico. Les contamos todo lo acontecido en el Simposio “Biomarcadores, de lo probado a lo promisorio”, realizado por el Laboratorio Domecq & Lafage, el cual tuvo lugar en el marco del 14º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas y contó con la participación de destacados disertantes nacionales e internacionales. Entre las temáticas abordadas podemos destacar la utilidad clínica, capacidad diagnóstica y balance costo efectividad de biomarcadores en enfermedades cardiovasculares y la importancia de desarrollar ensayos de alta sensibilidad para mejorar la precisión en el diagnóstico del infarto agudo de miocardio, entre otros temas. Tecnolab, de la mano de la Bioq. Mónica Rodríguez y de la Dra. Florencia Siciliano perteneciente a la División Patología y Anticuerpos del laboratorio nos presentan un estudio donde resaltan la importancia de los ensayos moleculares en el diagnóstico y la clasificación de las neoplasias malignas, permitiendo incluso identificar subtipos específicos de una neoplasia en particular. Tecnolab en este estudio ofrece pruebas moleculares de diagnóstico in vitro (IVD) de IPSOGEN para enfermedades oncohematológicas. Estos kits no solo permiten el diagnóstico y la clasificación de la neoplasia, sino también determinar pronóstico y guiar una terapia. Y por último una nota que nos habla de la relación entre la obesidad y la insulino resistencia con el antígeno prostático específico. Un trabajo realizado por un grupo de investigadores que estudian la asociación entre los marcadores de la insulino resistencia con los niveles circulantes del marcador del tejido prostático, además evalúan la relación entre la obesidad general y abdominal con valores elevados del Antígeno Prostático Específico.
Dr. Gerardo De Blas
Director de Contenidos
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Nota 1: Electroforesis bidimensional en orina: una alternativa para el laboratorio clínico.
En el siguiente trabajo un equipo de profesionales del Departamento de Bioquímica Clínica del Laboratorio de Proteínas (INFIBIOC) del Hospital de Clínicas José de San Martín nos presentan un método la electroforesis bidimensional para el análisis de rutina de proteínas urinarias. Este método no invasivo se aproxima a la tecnología emergente de la proteómica que permite el análisis simultáneo de varias proteínas urinarias como una herramienta para el diagnóstico y monitoreo de una variedad de enfermedades humanas.
María Laura Facio, Leticia Madalena, Susana Fraind, Mariel Alejandre, Pablo Bresciani, Marco Bresciani, Marco Pizzolato.
Resumen:
En este trabajo se presenta un método confiable para el análisis de rutina de proteínas urinarias. El método es la electroforesis bidimensional que combina la electroforesis en acetato de celulosa con la electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio seguida de tinción argéntica. La electroforesis bidimensional abre el espectro de proteínas, siendo algunas de ellas identificadas por immunoblotting o espectrometría de masa MALDI. Dichas proteínas son de bajo peso molecular: Orosomucoide (40 kDa), apolipoproteína AI (28 kDa), zinc-alfa 2-glicoproteína (43 kDa), fragmento del perlecan C-terminal LG3 (23 kDa), prostaglandina D2 sintasa tipo lipocalina (29 kDa) e inter-alfa inhibidor de tripsina cadena pesada H4 (35 kDa). Estas proteínas están incluidas en estudios de falla renal aguda, falla renal crónica, trasplante renal, enfermedad glomerular y enfermedad maligna del tracto urogenital. El método, no invasivo, se aproxima a la tecnología emergente de la proteómica que permite el análisis simultáneo de varias proteínas urinarias como una herramienta para el diagnóstico y monitoreo de una variedad de enfermedades humanas.
Nota 2: Hacia una mejora continua de la gestión en preanalítica en el Laboratorio Clínico.
En la siguiente entrevista a la Dra. Imma Caballé Martin, Master en Bioquímica Clínica y Patología Molecular y actual Directora del Instituto CATLAB de Barcelona, España nos cuenta los principales desafíos en su camino hacia la mejora de la gestión en preanalítica y como fueron resueltos, un aporte muy importante que puede beneficiar al desarrollo de la actividad bioquímica local.
BD Sistemas Preanalíticos BD Vacutainer
Resumen:
El pasado mes de noviembre, con motivo de brindar una disertación en el marco del VII Congreso Argentino de Calidad en el Laboratorio Clínico (CALILAB), nos visitó en Argentina de la Dra. Imma Caballé Martin, actual Directora del Instituto CATLAB (Barcelona, España). Tuvimos la oportunidad de entrevistarla con la intención de conocer sus opiniones que podrían beneficiar mucho el desarrollo de nuestra actividad profesional local.
La falta de uniformidad de las solicitudes médicas: al principio las solicitudes médicas llegaban al laboratorio en diferentes formatos y soportes, es decir, algunas escritas en papel y otras vía electrónica.
Sabemos que los procesos realizados en forma manual, como ingresar una orden escrita a mano al sistema electrónico son propensas a errores, pudiendo ser insuficiente la información en la misma, incorrecta o incompleta. Muchas veces este tipo de errores inhabilita el procesamiento de las muestras, como ser la ilegibilidad del nombre del paciente. Otras veces dificulta la validación de los resultados ya que no se tiene información sobre la medicación o diagnóstico presuntivo del paciente.
Nota 3: Estudio citológico de la orina: Importancia de la etapa preanalítica.
La orina es un material biológico de fácil obtención y constituye un método no invasivo, de bajo costo, de alta especificidad y de elevado valor predictivo. El diagnóstico citológico constituye una evidencia patológica en distintas enfermedades del tracto urinario. En este trabajo nos explican la importancia de minimizar los errores de la etapa preanalítica, la toma de muestra y la citología urinaria para poder aumentar la eficacia en el diagnóstico y arribar a un correcto citodiagnóstico.
Rocher A., Harriet L. Jefa del Área Citología de Manlab.
Resumen:
La orina es un material biológico de fácil obtención en el que se realizan variadas pruebas diagnósticas en la práctica clínica.
El diagnóstico citológico de la orina constituye una evidencia patológica en distintas enfermedades del tracto urinario, con máximo rendimiento en los tumores uroteliales vesicales.
El laboratorio de citología realiza diferentes tipos de pruebas que aportan al diagnóstico, desde el urocitograma que brinda una información de la respuesta hormonal del epitelio hasta el estudio citológico en orina que determina desde un proceso inflamatorio hasta un probable cáncer de vejiga.
Para poder efectuar un buen estudio citológico es necesario cumplimentar debidamente la fase pre analítica ya que la orina es un medio “hostil” para las células y la viabilidad de las mismas se modifica con el transcurso del tiempo.
En 1945, Papanicolaou y Marshall publicaron un estudio sobre la utilidad de la citología de orina, a partir del cual se empezó a recomendar como método diagnóstico en alteraciones urológicas.
El citodiagnóstico urinario es un procedimiento que ha mostrado su eficacia en el diagnóstico inicial del carcinoma urotelial, sobre todo en los de alto grado, en el seguimiento de pacientes que han sido intervenidos por dicha patología, pero también en el estudio de procesos inflamatorios o en las infecciones virales.
Nota 4: Estudio del semen humano: implementación de un método objetivo.
En el siguiente trabajo unos equipos de profesiones de diferentes instituciones de alto prestigio de Argentina nos presentan una estandarizan y validación de un sistema computarizado de análisis de semen CASA (Sperm Class Analyzer) para los módulos de concentración y movilidad espermática de acuerdo a normas internacionales.
Patricia Haydee Chenlo, Julia Irene Ariagno, Mercedes Norma Pugliese, Herberto Ernesto Repetto, Lydia Melba Sardi Segovia, Gabriela Ruth Mendeluk, Susana Mercedes Curi.
Resumen:
El objetivo del presente trabajo fue estandarizar y validar un sistema computarizado de análisis de semen CASA, SCA (Sperm Class Analyzer) para los parámetros de concentración y movilidad espermática de acuerdo a normativas internacionales. Se estandarizó el tipo de velocidad para la clasificación en grados y la profundidad adecuada de la cámara. Para la validación se determinó precisión, límite de detección, intervalo de medición y estudio de comparación de métodos. Se halló alta correlación lineal en la clasificación del movimiento empleando Velocidad Curvilínea o Velocidad Promedio (r=0,99; p<0,001), estableciendo el uso de la primera para obtener resultados comparables con otros sistemas objetivos. También, se normatizó el empleo de cámaras de 10 μm de profundidad debido a que se obtienen mejores imágenes para el análisis sin afectar la movilidad. La imprecisión media fue 13,29%, 14,26% y 18,75% para recuento, móviles progresivos y móviles grado respectivamente. Se halló alta correlación con el método manual, tanto en concentración (r=0,97, p<0,0001), móviles progresivos (r=0,84; (p<0,001) y móviles grado (a) (r=0,82; p<0,0001). Se comprobó linealidad (r=0,99; p<0,001), entre 0,98 x 106 y 125 x 106 esp/mL. Se concluye que el método propuesto cumple con los requisitos necesarios para su empleo en la clínica, siendo indispensable la edición de las imágenes por parte de un operador calificado.
Nota 5: Simposio “Biomarcadores, de lo probado a lo promisorio”, del Laboratorio Domecq&Lafage.
Este simposio organizado por el Laboratorio Domecq&Lafage tuvo lugar en el marco del 14º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas y contó con la participación de destacados disertantes del país y del exterior. Entre las temáticas abordadas podemos destacar la utilidad clínica, capacidad diagnóstica y balance costo efectividad de biomarcadores de enfermedad cardiovascular y la importancia de desarrollar ensayos de alta sensibilidad para mejorar la precisión en el diagnóstico del infarto agudo de miocardio, entre otros temas.
Resumen:
La conferencia tuvo lugar en el marco del 14º Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas realizado en el Sheraton Buenos Aires Hotel & Convention Center, Buenos Aires, Argentina.
En una primera instancia la Dra. Domecq abordó la temática referente a la Utilidad Clínica, Capacidad Diagnóstica y Balance Costo Efectividad de los Biomarcadores Pro-BNP (NT-ProBNP), Troponina T, Procalcitonina y PCA3, con el objetivo de realizar un análisis de la utilidad clínica consistente en el valor diagnóstico, pronóstico y monitoreo; de reflexionar acerca de la capacidad diagnóstica, es decir cómo la “sensibilidad y la especificidad” se traducen en la interpretación de resultados y realizar un test diagnóstico “costo efectivo”.
Siendo el infarto agudo de miocardio (IAM) la principal causa de mortalidad y discapacidad a nivel mundial y, teniendo en cuenta que su incidencia aumenta de forma continua, el experto destacó la importancia de desarrollar ensayos de alta sensibilidad para mejorar la precisión de su diagnóstico, mejorar la estratificación del riesgo y guiar adecuadamente el tratamiento de los pacientes y así mejorar los resultados.
Nota 6: Diagnóstico Molecular- Medicina personalizada en Oncohematología.
En el presente trabajo la Bioq. Mónica Rodriguez y la Dra. Florencia Siciliano de la División de Patología y Anticuerpos de Tecnolab nos cuentan la importancia de los ensayos moleculares en el diagnóstico y clasificación de las neoplasias malignas, permitiendo incluso identificar subtipos específicos de una neoplasia en particular. Tecnolab ofrece pruebas moleculares de diagnóstico in vitro (IVD) de IPSOGEN para enfermedades oncohematológicas. Estos kits no solo permiten el diagnóstico y clasificación de la neoplasia, sino también determinar pronóstico y guiar una terapia.
Bioq. Mónica Rodríguez y Dra. Florencia Siciliano.
Resumen:
Las neoplasias mieloproliferativas (NMPs) son un grupo de enfermedades clonales de células progenitoras hematopoyéticas multipotenciales.
Las NMP comprenden la policitemia vera (PV), la trombocitemia esencial (TE) y mielofibrosis primaria (MFP). A su vez tanto la PV como la TE pueden progresar a mielofibrosis. Cada una de estas entidades presentan recuentos sanguíneos anómalos que a su vez varían de acuerdo a la patología como eritrocitosis en policitemia vera y trombocitosis en la TE.
Los ensayos moleculares desempeñan una función clave en el diagnóstico y clasificación de las neoplasias malignas, y también pueden ayudar a identificar subtipos específicos de una neoplasia particular. La leucemia mieloide crónica (LCM) fue la primera hemopatía maligna en la que pudo observarse una correlación directa entre la existencia de un oncogen quimérico y la aparición de la enfermedad.
La presencia de una anormalidad genética adquirida entre el cromosoma 9 y 22, traslocación t (9;22) produce un reordenamiento de los genes BCR/ABL dando lugar a la formación del cromosoma Philadelphia. La proteína resultante es una tirosin kinasa, target de acción de los tratamientos. El cromosoma Philadelphia se encuentra en el 90% de los enfermos con LMC y en algunos pacientes con leucemia aguda.
Nota 7: Relación entre obesidad e insulino resistencia con el antígeno prostático específico.
El Cáncer de Próstata es una enfermedad muy frecuente en individuos mayores de 50 años, es el segundo tipo de cáncer más común en hombres. Antecedentes bibliográficos revelan que la obesidad y la insulino resistencia participarían en su iniciación y progresión. En el siguiente trabajo un grupo de investigadores estudian la asociación entre los marcadores de la insulino resistencia con los niveles circulantes del marcador del tejido prostático, además evalúan la relación entre la obesidad general y abdominal con valores elevados del Antígeno Prostático Específico.
Adriana D. Fridrich, Graciela A. Bonneau, Williams R. Pedrozo, Carlos A. Novau, Alberto L. Palacios, Daniel Angeloni.
Resumen:
El Cáncer de Próstata (CaP) es el segundo tumor de mayor prevalencia entre los varones occidentales mayores de 50 años. La obesidad y la insulino resistencia (IR) participarían en su iniciación y progresión. Nuestros objetivos fueron: evaluar la relación de la Obesidad General y Abdominal con valores elevados del PSA: determinar el grado de IR a través de distintos marcadores secundarios como los índices HOMA y triglicéridos/ColesterolHDL y establecer la posible asociación con los niveles circulantes de PSA. Se estudiaron 103 hombres de entre 45 y 65 años de edad. Se tomaron medidas antropométricas. Se les realizó una extracción sanguínea para la determinación de PSA total y libre, Triglicéridos, Col-HDL, Insulina, Glucemia y con estos últimos se calculó el índice HOMA.
Los resultados obtenidos muestran que el 44% de los pacientes presentaron valores de PSA elevados. No hallamos asociación entre del PSA con el IMC, pero si con la circunferencia de cintura. Al evaluar si existía correlación entre el PSA y los índices HOMA y Triglicéridos/Col-HDL no encontramos diferencias significativas. Podemos concluir que esta asociación encontrada de la obesidad abdominal con valores elevados de PSA, nos sugiere que podríamos usar este parámetro como factor de riesgo potencial para el desarrollo de alguna enfermedad prostática.
Nota 8: El factor de transcripción WT-1 y su relación con el desarrollo de la injuria renal inducida durante la nefropatía obstructiva.
La nefropatía obstructiva congénita es la causa primaria de la enfermedad renal terminal en niños. En el siguiente trabajo la Lic. Mazzei y el Dr. Manucha nos describen la relación entre el factor de transcripción WT-1 y el desarrollo de la injuria renal inducida durante la nefropatía obstructiva. Conocer los mecanismos genéticos y moleculares permitirá saber con mayor profundidad la relación entre las diferentes proteínas y las posibles consecuencias fisiopatogénicas. Esto permitirá realizar un diagnóstico e inicio del tratamiento rápido, lo que ayudará a preservar las funciones vitales del riñón.
Luciana Jorgelina.
Resumen:
El estudio del desarrollo renal sirve como un paradigma para comprender los mecanismos que son la base de la formación de un órgano. Múltiples genes desempeñan funciones trascendentes en el desarrollo renal temprano, entre los que se destaca WT-1. Se ha comprobado experimentalmente que la proteína WT1 en unos casos reprime y en otros activa la transcripción de numerosos genes, pero sus dianas fisiológicas son poco conocidas. Recientes investigaciones genéticas han permitido caracterizar muchas de las complejas interacciones entre los componentes individuales, sin embargo, la concreción de nuevos experimentos bioquímicos, moleculares y funcionales como los propuestos en nuestro y otros laboratorios de investigación, nos permitirán establecer con mayor profundidad el grado de compromiso entre las proteínas participantes y las posibles consecuencias fisiopatogénicas de su desacople.
La enfermedad renal crónica tiene una elevada incidencia en todo el mundo y entre los desórdenes renales más complejos, se destaca la nefropatía obstructiva. Por nefropatía y uropatía obstructiva se describen entidades patológicas que causan hidronefrosis por obstrucción del tracto urinario. Esta enfermedad es frecuente en niños debido a fallas congénitas del tracto urinario sobre todo a nivel de la unión ureteropélvica e involucra respuestas hemodinámicas, así como hidrodinámicas, las que conducirían a cambios celulares en todos los compartimientos renales, fibrosis intersticial, apoptosis y atrofia tubular.
