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Revista Nº 41 Setiembre - Octubre 2011

Sumario Editorial Diagnstico Bioqumico Investigacin Entrevista Gacetilla Agenda Arte Bioagenda

Diagnstico Bioqumico


Evaluacin de un Nuevo Elisa para la deteccin de anticuerpos anti-HIV-1 y anti-HIV-2 de 3 generacin

Autor: Malacrida, C; Capriotti, G. A. y Torruella, M.Centro de Investigacin y Biotecnologa, Wiener lab., Rosario, Argentina. E-mail: cmalacrida@wiener-lab.com.ar



ntroduccin

Los virus de la inmunodeficiencia humana HIV-1 y HIV-2 son los agentes causales del Sndrome de la Inmuno-deficiencia Adquirida (SIDA). Estos retrovirus se transmiten por contacto con fluidos corporales infectados tales como sangre o productos derivados de la misma, secreciones genitales y por pasaje a travs de la placenta. Evidencia serolgica de la infeccin por estos virus puede obtenerse determinando la presencia de anticuerpos en suero o plasma de individuos en los que se sospecha infeccin. Se ha desarrollado un nuevo producto denominado HIV 1+2 ELISA 3 generacin para la deteccin de anticuerpos contra HIV-1, HIV-1 grupo O y HIV-2 en suero o plasma.

El diseo de los ELISA de tercera generacin (sndwich de antgeno) permite un gran avance para acortar el perodo ventana, ya que puede detectar otras inmunoglobulinas como IgM e IgA que se encuentran presentes durante la serocon-versin adems de presentar una mayor sensibilidad analtica para IgG.

Objetivo

Evaluar la sensibilidad, especifi-cidad y precisin del nuevo producto HIV 1+2 ELISA 3 generacin Wiener lab.

Materiales y mtodos

Fundamentos: Los pocillos de la policubeta estn recubiertos con antgenos recombinantes de los virus HIV-1 y HIV-2. La muestra se incuba en los pocillos. Si la muestra contiene anticuerpos contra HIV-1 o HIV-2, los mismos se unirn a los antgenos sensibilizados en la placa. El material no unido es removido por lavado. En el paso siguiente se agrega el conjugado que contiene los mismos antgenos de la placa conjugados a peroxidasa, estos se unirn a los anticuerpos si estaban presentes en la muestra. El conjugado no unido se remueve por lavado. Luego se agrega una solucin conteniendo tetrame-tilbencidina y perxido de hidrgeno. Las muestras reactivas desarrollan color celeste que vira al amarillo cuando se detiene la reaccin con cido sulfrico.

Resultados

Sensibilidad

Los paneles de seroconversin son muestras de plasma recolectadas de un solo donante, durante el desarrollo de una infeccin viral y la respuesta inmune subsiguiente.
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